/en
بازدید سایت

بازديد صفحات : 6125
بازديد امروز : 769
كل بازديدها : 43763407
افراد آنلاين : 161

نويسندگان رحیم تقی زادفرید و زهره کدخدا     تاريخ انتشار : 92/08/01
تعيين مقدار ترگونلین در بذر شنبلیله
تعيين مقدار ترگونلین در تخم شنبلیله
1-هدف
در اين SOP   مقدار تري گونلين در بذر شنبليله تعيي مي شود.
2-وسايل مورد نياز:
اكسيد منيزيم
آب مقطر
بن ماري
UV
اولتراسونيك
فيلتر ميكرو

روشها
آماده كردن نمونه از بذرهاي ارسالي :
الف- از پودر بذرهاي تهيه شده به ميزان 1 گرم به دقت (توسط ترازوي ديجيتال با دقت 5 ميكروگرم) توزين و با يك گرم اكسيد منيزيم و50 ميلي ليتر آب مخلوط كرده و به مدت 20 دقيقه در بن ماري با دماي 100 درجه سانتيگراد قرار مي دهيم ، سپس آنرا به حجم 100 ميلي ليتر رسانده و پس از صاف كردن جذب نوري نمونه ها را در مقابل نمونه بلانك در طول موج 268 نانومتر مي خوانيم و با استفاده از منحني استاندارد تريگونلين ، مقدار آنرا در نمونه هاي مجهول تعيين مي كنيم.
ب- براي تهيه نمونه HPLC ، پس از توزين مقدار 500 ميلي گرم از پودر دانه گياه را با 500 ميلي گرم اكسيد منيزيم و 100 ميلي ليتر آب مخلوط  كرده و 20 دقيقه در حمام آب گرم در دماي 105 درجه سانتيگراد قرار مي دهيم ، بعد از زمان گفته شده عصاره حاصل را صاف كرده و به طور مستقيم به دستگاه تزريق مي كنيم.(از نمونه هر شهر چهار نمونه جداگانه تهيه و تزريق مي كنيم)
آماده كردن نمونه استاندارد: براي تهيه استاندارد خارجي از پودرهاي خريداري شده پس از اندازه گيري دقيق در 5 بالن ژوژه جداگانه ريخته و جهت تهيه رقت هاي مناسب (1/0 ، 2/0 ، 5/0 ، 7/0 و 1 ميلي گرم در ميلي ليتر) با آب به حجم رسانديم. در ادامه به كمك دستگاه اولتراسونيك كاملا انحلال صورت گرفت و پس از فيلتراسيون با فيلتر ميكروني مخصوص از هر كدام از محلولهاي بدست آمده 4 نمونه داخل دستگاه خودكار تزريق (autosampler) قرار گرفت.
 روش اندازه گيري: در اين تحقيق ابتدا بر اساس روشهاي فارماكوپه اي رايج تعيين مقدار تري گونلين با اسپكتروفتومتر UV انجام شده و از روي ميزان جذب ، درصد تريگونلين در بذر گياه شنبليله مشخص ميگردد، سپس اين تعيين مقدار با روش HPLC تكرار گرديده و در ادامه روش اجرا شده توسط HPLC جهت تعيين مقدار تري گونلين معتبرسازي شده است.
از آنجا كه طول موج جذبي تريگونلين و نيكوتينيك اسيد در اسپكتروفتومتري مشابه است(268 نانومتر) و با اسپكتروفتومتر UV ميزان تجمعي اين دو ماده با هم محاسبه ميشود ، ارقام حاصل از روش اخير بايد با مجموع مقدار تري گونلين و نيكوتينيك اسيد محاسبه شده توسط HPLC مقايسه ونتيجه گيري انجام شود.
معتبر سازي
استاندارد خارجي : غلظت هاي مختلف 1/0 ، 2/0 ، 5/0 ، 7/0 و1 ميلي گرم در ميلي ليتر از محلول استاندارد حاوي تري گونلين و نيكوتينيك اسيد آماده شد . سپس از هر كدام 4 نمونه جداگانه تهيه گرديد و به ترتيب تزريق انجام شده است.
منحني كاليبراسيون: از روي مساحت زير منحني به دست آمده بر حسب غلظت ، منحني كاليبراسيون براي نمونه هاي معلوم (استاندارد) تري گونلين و نيكوتينيك اسيد به طور مجزا رسم شده است، سپس از روي فرمول خط رگرسيون (y=ax+b) مقادير مجهول (ميزان تريگونلين و نيكوتينيك اسيد در نمونه بذرهاي ارسالي) محاسبه مي شود:
شيب خط كاليبراسيون / (عرض از مبدا – مساحت زير منحني پيك مجهول) = غلظت پيك مجهول به منظور رسم منحني كاليبراسيون از روش كمترين مربعات و از نرم افزار شركت مايكروسافت(M.S.Excel 2003) استفاده شده است.
اندازه گيري در دو طول موج : بر اساس گزارش روشهاي فارماكوپه اي طول موج بهينه براي اندازه گيري نيكوتينيك اسيد 264 و براي تري گونلين 268 نانومتر مي باشد ، براي تاكيد بيشتر و همچنين مقايسه ، ثبت نتايج HPLC در هر دو طول موج آشكارساز انجام شده و براي هر كدام از طول موج ها به صورت جداگانه منحني كاليبراسيون ترسيم شده است.
تكرارپذيري و دقت : اندازه گيري مساحت زير منحني با 5 غلظت مختلف انجام شده و دقت آن به كمك انحراف معيار و ضريب تغييرات بيان گرديده است. همچنين تغييرات داخل روز (صبح ،ظهر و عصر) و بين روز(روزهاي صفر، يك و دو) براي تعيين مقدار تري گونلين ارزيابي شده است.

Ref: BP2001
منبع مقاله : bp2001
مجوزها و گواهینامه ها
  • مجوز مجوز
  • مجوز مجوز
  • مجوز مجوز
  • مجوز مجوز
  • مجوز مجوز
  • مجوز مجوز
  • مجوز مجوز
تماس با ما
دفتر تهران: 88282482 021
عضويت در خبرنامه
پست الكترونيك  

  درخواست
صفحه اصلي | نقشه سايت | تماس با ما
كليه حقوق اين وب سايت متعلق به شركت آدونيس گل دارو مي باشد